摘要
本发明建立了一种二肽基肽酶‑4抑制剂快速筛选方法,旨在提供一种具有灵敏度高、重现性好、结果可靠稳定、简便快捷、成本低廉等特点的二肽基肽酶‑4抑制剂快速筛选方法,其技术方案包括以下步骤:Caco‑2细胞体外培养,并对其进行充分裂解;测定Caco‑2细胞裂解液中BCA蛋白量后保存备用;配置荧光反应底物后保存备用;通过多功能微孔板读数仪检测记录黑色微孔板中各孔中不同细胞裂解液浓度和不同荧光底物孵育不同时间时的荧光强度数值,确定最优裂解液浓度、催化反应荧光底物浓度及孵育时间条件;配置阳性抑制剂药物,基于上述最优体系计算计算孵育不同时间时各阳性药物的半抑制率IC50,通过与其各自文献报道的IC50数值进行相关性分析,验证该快速筛选方法的准确性。
技术关键词
快速筛选方法
多功能微孔板
细胞裂解
细胞体外
荧光
细胞超声
底物
蛋白定量试剂盒
药物筛选模型
读数仪
细胞培养皿
待测药物
水浴锅
破碎机
保存液
液氮
数值