摘要
本发明公开了一种小鼠双单倍胚胎干细胞分离建系的方法,属于胚胎干细胞领域,步骤如下:超数排卵C57BL/6雌鼠,获取MII卵母细胞;孤雌激活小鼠MII期卵母细胞后得到单倍体胚胎,在2‑细胞阶段将其电融合得到双单倍体胚胎;体外培养至桑椹胚和囊胚阶段,培养于胚胎干细胞培养体系中并置于二氧化碳培养箱中,经换液传代后分离得到小鼠双单倍体胚胎干细胞;对该细胞系进行鉴定。小鼠双单倍体胚胎干细胞的建立有利于隐性等位基因的筛选、基因和表型的研究以及哺乳动物的基因组选育等,同时有望用于制备纯合的基因修饰动物疾病模型,在胚胎发育,干细胞,遗传筛选和再生医学等研究中具有潜在应用价值。
技术关键词
单倍体胚胎干细胞
胚胎干细胞培养体系
小鼠
孕马血清促性腺激素
人绒毛膜促性腺激素
超数排卵
Wnt信号通路
信号通路抑制剂
白血病抑制因子
二氧化碳培养箱
动物疾病模型
囊胚
胎牛血清
桑椹
阶段
细胞系
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