摘要
本发明涉及一种IL‑1f9K124A点突变的杂合子小鼠模型构建方法,包括:第一步,获取Cas9mRNA、gRNA和oligo donor DNA;第二步,将第一步中获得的Cas9mRNA、gRNA和oligo donor DNA,显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵雄原核中,将注射后的受精卵移植到假孕母鼠的子宫中,以此方式孕育出生的小鼠即为F0代小鼠;第三步,对所述F0代小鼠通过PCR扩增及测序对其进行基因型鉴定,将经过鉴定的F0代阳性小鼠与C57BL/6J小鼠交配,繁育获得F1代小鼠;第四步,通过PCR扩增及测序对F1代小鼠进行基因型鉴定,F1代阳性小鼠,即为可稳定遗传的IL‑1f9K124A点突变的杂合子小鼠;第五步,对第四步中获得的IL‑1f9K124A点突变的杂合子小鼠进行咪喹莫特诱导获取银屑病小鼠模型。与现有技术相比,本专利具有显著的进步。
技术关键词
小鼠模型构建方法
野生型小鼠
咪喹莫特乳膏
制作石蜡切片
银屑病
RNA纯化
引物
HE染色
皮损
脱毛
子宫
序列
位点
涂抹
样本
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