摘要
本发明涉及动物基因工程领域,尤其涉及一种表达hCTLA4‑Ig和hPD‑L1猪细胞的构建方法及其应用。本发明利用CRISPR/Cas9技术和四环素介导的调控系统,构建了多西环素诱导表达hPD‑L1和hCTLA4Ig的猪模型。本发明所述的构建方法只需要一步基因修饰和一轮体细胞核移植就能得到受外源药物(多西环素)诱导表达两个目的基因的猪模型,极大缩短了制备四环素诱导调控猪模型的周期,降低了实验的时间和经济成本。本发明首次在猪上实现hPD‑L1和hCTLA4Ig的四环素诱导表达,其表达能降低免疫排斥反应,可应用于异种移植。
技术关键词
打靶载体
体细胞核移植技术
四环素
动物基因工程
核苷酸
多西环素
猪模型
调控系统
序列
位点
系列
药物
周期
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