摘要
本发明涉及微流控技术领域,具体涉及一种基于微流控芯片的高通量近似单细胞空间转录组建库的方法,其包括以下步骤:将组织切片在单个微孔中进行前期处理,包括固定、通透以及在组织原位上反转录获得DNA和RNA分子杂合链;将微流控芯片贴在组织切片上以空间维度高通量捕获mRNA,使单个像素位点的mRNA分子便携带能够识别自身身份的识别码;对杂合链进行链转换成为双链cDNA,随后对cDNA进行一轮扩增,扩大其分子量;之后对定量后的cDNA进行Tn5打断,再进行二轮扩增,最后将带有测序接头的文库进行纯化后送样测序。本发明实现了在空间上高通量以及近似单细胞的高分辨率下捕获足够后续分析的基因数以及mRNA类别数。
技术关键词
微流控芯片
高通量
组织切片
流道
测序接头
识别码
分子
微流控技术
二甲基硅氧烷
位点
文库
身份
通道
像素
原位
溶液
基因
标记
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