一种肾小球系膜区病理性IgA沉积小鼠模型的构建方法及应用

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一种肾小球系膜区病理性IgA沉积小鼠模型的构建方法及应用
申请号:CN202411439411
申请日期:2024-10-15
公开号:CN119220605A
公开日期:2024-12-31
类型:发明专利
摘要
本发明公开了一种肾小球系膜区病理性IgA沉积小鼠模型的构建方法及应用,属于生物技术领域,本发明包括如下步骤:步骤1、gRNA设计;步骤2、Donor载体构建、凝胶回收、连接与转化、菌落筛选、阳性克隆质粒提取、酶切鉴定和测序、注射用质粒制备;步骤3、gRNA合成;步骤4、RNP复合物制备;步骤5、受精卵准备;步骤6、原核显微注射;步骤7、代孕鼠准备及胚胎移植;步骤8、F0代小鼠鉴定;步骤9、转基因小鼠繁殖与建系。本发明方法从模拟IgAN的发病机制出发,为筛选能够分解系膜区免疫复合物沉积的药物、探究早期IgA清除机制,以及采用生物学方法清除异常沉积的IgA从而达到治疗IgA肾病的研究提供一种简单易行的动物模型。
技术关键词
小鼠模型 IgA肾病 转基因小鼠 动物模型 复合物 绒毛膜促性腺激素 质粒提取试剂盒 整合外源基因 回收试剂盒 倒置显微镜 注射针 培养箱 培养基 溶液 凝胶 胚胎 载体 小规模
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