6030442E23Rik条件性基因敲除小鼠模型的构建方法

本发明公开了一种6030442E23Rik条件性基因敲除小鼠模型的构建方法，属于基因工程技术领域，利用同源重组原理，采用受精卵同源重组的方式，对6030442E23Rik基因进行flox修饰。简要过程如下：通过体外转录的方式，获得Cas9mRNA和gRNA；通过In‑Fusion cloning的方法构建同源重组载体(donor vector)，该载体包含2.9kb 5’同源臂、2.2kb的flox区域和2.6kb 3’同源臂。将Cas9mRNA、gRNA和donor vector显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中，获得F0代小鼠，PCR扩增及测序鉴定阳性的F0代小鼠。