一种基于单个B细胞光导技术的CK-MB重组单克隆抗体筛选方法

本发明涉及生物技术领域，具体为一种基于单个B细胞光导技术的CK‑MB重组单克隆抗体筛选方法，包括以下步骤：(1)制备可溶蛋白异源二聚体CK‑MB；(2)使用具有活性的异源二聚体CK‑MB作为免疫原对小鼠进行免疫实验；(3)分选出小鼠CD138阳性浆细胞；(4)单B平台上机分选出特异性单个浆细胞；(5)提取单B细胞并制备cDNA，并进行抗体轻重链可变区基因扩增及DNA片段回收，获取抗体重轻链可变区序列；(6)构建重组表达载体，共转染到宿主细胞进行真核表达、纯化，得到针对CK‑MB的单克隆抗体。本发明提供的单克隆抗体筛选方法简单快捷、所需细胞数量较少、效率高，能满足迅速获得单克隆抗体的需求。