一种靶向肠道M细胞的双抗原1型糖尿病疫苗及其制备方法

本发明涉及一种靶向肠道M细胞的双抗原1型糖尿病疫苗及其制备方法，属于生物技术领域。该方法将人源性GAD65191‑320、INS17‑110、以及CKS9靶向肽CKSTHPLSC，通过G4S连接肽按上述顺序连接，经过乳酸菌密码子偏好优化后，一同插入pNZ8148载体，然后将构建的重组质粒转化至MC1061感受态大肠杆菌中进行克隆扩增，提取重组质粒；重组质粒电转入NZ9000感受态乳酸乳球菌，构建成GAD65191‑320+INS17‑110+CKSTHPLSC重组乳酸菌疫苗，扩增后，用Nisin诱导表达融合蛋白。本发明将重组乳酸菌疫苗口服免疫STZ诱导的BALB/c糖尿病模型小鼠，可诱导小鼠产生GAD65+INS特异性抗体，并促进调节性T细胞、分泌白细胞介素10的树突状细胞增殖，以诱导免疫耐受，抑制幼稚DCs分化，维持血糖水平，从而达到预防和治疗1型糖尿病的目的。