摘要
本发明公开了一种修饰的DNA carry基于固态纳米孔检测人凝血酶的应用,通过利用修饰的双链DNA(double‑stranded DNA,dsDNA)分子连接特异性蛋白的结合区,精确检测待检蛋白质分子,设计的双链DNA的模锻分别含有3’端胆固醇(圆圈结构)修饰,以便于捕获穿孔率;5’端含有生物素(小长方形)修饰,以便于链霉亲和素磁珠的特异性纯化;本发明修饰的DNA carry容易构建,带高度负电荷,可以通过蛋白质工程设计来提高它们的目标选择性和结合亲和力(通常从nM到pM),选择性和亲和力在检测和识别临床样品或其他生物液体中的罕见生物分子或疾病的诊断中尤为重要,从而进一步减少非特异性结合分析物的相互作用,并防止通常报道的孔堵塞。
技术关键词
固态纳米孔
人凝血酶
蛋白质工程设计
氮化硅
互补链
链霉亲和素
生物素
亲和力
芯片
胆固醇
去离子水
模锻
磁珠
甲醇
模板
乙醇
分子
混合物
负电荷
氮气