摘要
本发明公开了一种Rpgr基因敲除小鼠模型的构建方法,属于基因工程技术领域。所述构建方法包括通过视网膜下注射将本发明所提供的重组gRNA表达载体注射入CRISPR/Cas9转基因小鼠体内,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,得到Rpgr基因敲除小鼠模型;所述小鼠为CRISPR/Cas9转基因的小鼠;或者将本发明所提供的重组gRNA表达载体与含表达Cas9的核苷酸序列的表达载体注射入野生型小鼠体内,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,得到Rpgr基因敲除小鼠模型。本发明所提供的构建方法敲除效果好,成本低,效率高,且敲除后的持久性好,视网膜组织结构完整,耗时少,方法简单,灵活性强,不需要进行大批量筛选,既避免了全身敲除对小鼠其他器官功能带来伤害,又大幅节省了研究时间,提高了研究效率。
技术关键词
gRNA表达载体
基因敲除小鼠模型
Cas9基因
编辑技术
质粒
视网膜色素变性
表达盒
转基因小鼠
核苷酸
序列
视网膜组织
野生型小鼠
基因工程技术
试剂盒
持久性
病毒
包装