摘要
本发明提供了一种基于四君子汤含药血清对肝干细胞影响的检测方法,所述方法包括细胞培养、含药血清制备、细胞增殖实验、细胞损伤模型建立与处理、氧化应激相关指标检测及蛋白表达分析等步骤。该方法通过CCK‑8法检测细胞活力、Hoechst 33342染色观察细胞核形态变化、Annexin V/PI双染结合流式细胞术检测凋亡率,以及Western blot检测凋亡相关蛋白表达,全面评价含药血清的作用机制。实验结果表明,四君子汤含药血清可促进肝干细胞的增殖,降低H2O2诱导的氧化应激损伤,提高细胞活性和抗氧化能力,降低细胞凋亡率,同时上调抗凋亡蛋白Bcl‑2的表达,抑制促凋亡蛋白Bax和Cleaved Caspase‑3的表达。
技术关键词
四君子汤
细胞损伤模型
检测细胞活力
抑制促凋亡
蛋白
氧化应激损伤
新生牛血清
酶标仪
比色法
荧光显微镜
细胞接种
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