摘要
本发明公开了一种单克隆山羊肌内前体脂肪细胞永生化细胞系、制备方法及应用,涉及永生化细胞领域。该方法包括:获取原代山羊肌内前体脂肪细胞;将携带SV40‑T的慢病毒感染原代山羊肌内前体脂肪细胞,并添加嘌呤霉素筛选出感染携带SV40‑T的慢病毒的阳性细胞;使用有限稀释法,将筛选出的阳性细胞按照每孔一个细胞铺板,培养后获得单克隆山羊肌内前体脂肪细胞株;将单克隆山羊肌内前体脂肪细胞株进行扩大培养,获得单克隆山羊肌内前体脂肪细胞永生化细胞系。该方法获得的永生化细胞系在确保山羊肌内前体脂肪细胞形态和功能的同时,显著增加了细胞的传代代数,而且不需要重复采样分离细胞,既保证了细胞具有相同的遗传背景,还极大的节约了成本和工作量。
技术关键词
永生化细胞系
单克隆
脂肪
病毒
培养基
细胞模型
无菌条件
水浴锅
密度
工作量
形态
序列
组织
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