摘要
本发明提供了一种表达Claudin18.2的293T细胞株及其制备方法:将表达Claudin18.2的慢病毒载体包装慢病毒并转染细胞获得病毒液;将病毒液按照MOI为0.1‑1感染293T细胞并培养,筛选单克隆。所述表达Claudin18.2的慢病毒载体包含表达Claudin18.2的表达盒,所述表达盒的启动子为CMV且不包含共表达基因。本发明获得的稳转细胞株无需依赖筛选药物,传代10次以上仍能稳定表达Claudin18.2基因且保持良好的细胞状态。该细胞株可作为Claudin18.2靶向的单克隆抗体、双特异性抗体、抗体偶联药物和嵌合抗原受体T细胞的体外杀伤实验阳性靶细胞,为靶向药的体外功能验证构建有效的细胞模型,为评估杀伤效能提供可靠依据。
技术关键词
慢病毒表达载体
筛选标记基因
嵌合抗原受体T细胞
转染试剂
抗体偶联药物
质粒
双特异性抗体
表达盒
慢病毒载体
启动子
细胞模型
抗性基因
单克隆抗体
重复序列
染液