摘要
本发明公开了一种表达XVII型胶原蛋白COL17A1的重组工程菌的制备方法,涉及基因工程技术领域,具体一种表达XVII型胶原蛋白COL17A1的重组工程菌的制备方法,所述方法包括如下步骤:基因合成和载体构建:合成人源XVII型胶原蛋白COL17A1的优化序列SEQ ID No.1,并在序列两端加上适当的限制性酶切位点;将合成的基因序列克隆到pGAPZ A‑αA载体上,确保基因在GAP启动子的控制下进行表达。该表达XVII型胶原蛋白COL17A1的重组工程菌的制备方法,通过GAP启动子的使用,本发明构建的重组工程菌能在不同环境条件下保持稳定的表达水平,GAP启动子作为组成型启动子,能在毕赤酵母中持续稳定地表达重组蛋白,无需外加诱导剂,简化了生产工艺,降低了生产成本,提高了生产效率。
技术关键词
重组工程菌
胶原蛋白
限制性酶切位点
重组毕赤酵母
分泌型表达
启动子
重组蛋白
控制发酵温度
培养基
基因工程技术
序列
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