一种基于发卡结构的荧光RNA探针及其应用

本发明公开了一种基于发卡结构的荧光RNA探针，通过筛选优化探针的茎区长度、GC含量、自由能和熔解温度、环区序列、热力学参数并适配荧光和淬灭基团，改善了其分子稳定性和检测灵敏度，最终得到序列为：5'‑FAM‑CGCUCUCACUGUAUUGAGAGCG‑TAMRA‑3'的荧光RNA探针。同时，本发明还研发了基于所述探针的检测方法和荧光检测试剂盒，采用双波长比率检测策略、动力学连续检测模式、三阶导数标准曲线拟合算法等手段，最终能够提高对RNAse A酶检测的准确性、可靠性、稳定性、特异性和灵敏度，具有开拓性的临床应用价值和广阔的市场前景。