α-1,2-岩藻糖基转移酶的高通量筛选方法及筛选得到的突变体

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推荐专利
α-1,2-岩藻糖基转移酶的高通量筛选方法及筛选得到的突变体
申请号:CN202411949322
申请日期:2024-12-27
公开号:CN119753083A
公开日期:2025-04-04
类型:发明专利
摘要
本发明涉及一种α‑1,2‑岩藻糖基转移酶的高通量筛选方法及筛选得到的突变体,属于酶工程技术领域。本发明提供一种α‑1,2‑岩藻糖基转移酶高通量筛选方法,步骤包括构建2’‑岩藻糖基乳糖的指示菌株,使2’‑岩藻糖基乳糖的含量与荧光强度呈正相关,之后在底盘菌株中表达L‑岩藻糖激酶和α‑1,2‑岩藻糖基转移酶突变体文库,将底盘菌株进行油包水液滴包埋并将其与指示菌株融合共培养,通过液滴微流控分选根据荧光检测结果得到包含α‑1,2‑岩藻糖基转移酶正向突变体的底盘菌株,其中突变体FutCV93I的酶活为原始酶的2.31倍,酶活力得到极大提升。使用本发明提供的方法,能够对α‑1,2‑岩藻糖基转移酶进行高通量筛选,有利于2’‑岩藻糖基乳糖的工业化生产及其在食品和医药等领域的大规模应用推广。
技术关键词
岩藻糖基转移酶 高通量筛选方法 指示菌株 突变体文库 岩藻糖基乳糖含量 岩藻糖苷酶 底盘 脂质载体 温控表 液滴微流控芯片 微生物菌剂 荧光报告基因
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