摘要
本发明公开了一种水泡性口炎病毒(VSV)感染低等多细胞模式动物秀丽隐杆线虫模型的构建方法,使用显微注射方式对成年秀丽隐杆线虫进行VSV病毒感染;VSV病毒感染滴度为1010‑1012PFU。本发明通过对病毒滴度、培养温度等条件的优化,首次实现了VSV病毒在秀丽隐杆线虫中的连续跨代传播,第90代子代线虫中仍然可检测到VSV病毒的存在,并且在跨代传播过程中呈现稳定的感染率,致死率和病毒载量;使用该技术可导致VSV感染线虫各种组织,并造成上皮,肌肉,神经等多种细胞的损伤或功能异常;而且建立了荧光成像和病理检测体系,能够实时监测病毒的感染动态和组织损伤情况;为病毒‑宿主互作基因的鉴定,各种致病机制的解析及抗病毒药物的筛选等提供强大的研究工具。
技术关键词
水泡性口炎病毒
绿色荧光蛋白标记
动物感染模型
秀丽隐杆线虫
细胞裂解
表达绿色荧光蛋白
细胞培养液
倒置荧光显微镜
模式
浓缩液
秀丽线虫
恒温培养箱
抗病毒药物
研究工具
培养基
成虫