摘要
本发明公开了一种CAPN1基因髓系特异性敲除小鼠病毒性心肌炎动物模型的构建方法,包括:对小鼠进行基因鉴定并区分基因型,提取基因组DNA,针对CAPN1基因和Lyz2‑Cre基因设计特异性引物并进行PCR扩增,PCR产物进行凝胶电泳检测;PCR反应体系包括提取的DNA、Taq聚合酶和dNTPs,CAPN1^flox/flox小鼠显示CAPN1基因的正常片段,cKO小鼠显示CAPN1基因特定区域的缺失,Lyz2‑Cre+小鼠显示Cre基因的条带,得到CAPN1基因髓系特异性敲除小鼠,即得。通过下调中性粒细胞中的Calpain1水平构建病毒性心肌炎动物模型,具有重要的应用价值。
技术关键词
病毒性心肌炎
敲除小鼠
动物模型
基因
DNA提取试剂盒
引物
琼脂糖凝胶电泳
PCR缓冲液
聚合酶
药物组合物
条带
序列
模板
载体
程序