一种巴马小型猪的ATP7B基因编辑体细胞的制备方法

本发明公开了一种巴马小型猪的ATP7B基因编辑体细胞的制备方法，包括以下步骤：S1、胎儿成纤维细胞的分离培养及鉴定，S2、ATP7B基因sgRNA设计，S3、Cas9‑ATP7B‑sgRNA表达载体的构建，S4、胎儿成纤维细胞的转染及sgRNA的筛选，S5、基因编辑单克隆细胞系的构建等等，从而完成基因编辑的巴马小型猪胎儿成纤维单克隆细胞的制备。本发明方法简单，可靠性高，具有较高的基因编辑效率，获得的ATP7B基因编辑的巴马小型猪体细胞，不仅有继续发育的能力，可用于后续WD动物模型的制备，而且其本身与心血管生长性状与人类相似，能够为WD神经退行性发病及恶化机制的研究提供理想模型。