摘要
本发明公开了一种利用rBMECs的血脑屏障穿透生物体外模型的制备方法及其应用,涉及药物筛选技术领域。本发明包括如下步骤:步骤1、细胞培养;步骤2、模型制备:将rBMEC和MDCK‑MDR1细胞接种在24孔板过滤器中静置四天;将单层细胞与预热的HBSS一起预孵育15分钟;预孵育期后,使用筷子电极测量每个单层的跨上皮/内皮电阻。本发明方法易于得到rBMECs细胞,比传统MDCK‑MDR1细胞血脑屏障模型更符合脑屏障生理特征,建模容易,且建模成本廉价、快速更可靠;本发明方法率先利用rBMECs细胞和MDCK‑MDR1细胞结合,发现rBMECs细胞和MDCK‑MDR1细胞相容性较高,更能形成血脑屏障的渗透膜,这能解决单一rBMECs细胞难以形成体外血脑屏障的难题,也能解决单一MDCK‑MDR1细胞形成的渗透膜缺乏大脑特异性特性的难题。
技术关键词
生物体外
星形胶质细胞
细胞接种
血脑屏障模型
药物筛选技术
渗透膜
丙酮酸钠
培养基
筷子
过滤器
细胞系
单层
电阻
电极
大鼠
基础
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