摘要
本发明提供了一种稳定表达猪Mx2蛋白的PK‑15细胞系及其制备与应用,通过慢病毒载体系统构建了稳定表达猪Mx2基因的PK‑15细胞系。根据GeneBank数据库中猪Mx2基因的核苷酸序列设计特异性引物,扩增出目的基因后构建重组慢病毒质粒,利用三质粒系统转染HEK293T细胞包装慢病毒,将获得的重组慢病毒感染PK‑15细胞,经嘌呤霉素筛选,获得稳定表达猪Mx2基因的PK‑15细胞系。实验结果表明,本发明成功构建了稳定表达猪Mx2蛋白的PK‑15细胞系PK‑15‑poMx2。与正常PK‑15细胞相比,猪Mx2稳定表达细胞系中Mx2表达量显著上升,且对PRV的复制具有抑制作用。因此,稳定表达猪Mx2蛋白细胞系的成功构建为深入探究猪Mx2蛋白的功能特性以及抗病毒作用机制提供了重要的工具。
技术关键词
重组慢病毒质粒
慢病毒载体系统
慢病毒包装
筛选抗病毒药物
稳定表达细胞系
蛋白
核苷酸序列设计
基因
病毒表达载体
质粒系统
细胞模型
单克隆
引物
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新型基因工程
构建稳定表达