双光子频域荧光寿命成像的体外细胞微环境动态监测方法

本发明涉及生物成像领域，具体公开了双光子频域荧光寿命成像的体外细胞微环境动态监测方法，包括：S1、利用双光子频域荧光寿命成像TP‑FD‑FLIM技术，并通过荧光寿命参数无损表征微环境变化，实时监测氧化应激反应及中性粒细胞迁移行为，结合体外细胞模型关联化合物效应分析；S2、基于FD‑FLIM的物理基础建立于周期性激发下的频域荧光寿命信号处理与分析系统，分析荧光信号相对激发光的相位延迟φ与调制深度M动态关联特性，对分子寿命参数的定量反推。本发明提出的双光子频域荧光寿命成像的体外细胞微环境动态监测方法，能够在亚细胞尺度上无损、实时地观察神经炎症反应。