一种高稳定性果胶甲酯酶突变体及其基于GRASP算法进行祖先序列重建的方法、制备方法和应用

一种高稳定性果胶甲酯酶突变体及其基于GRASP算法进行祖先序列重建的方法、制备方法和应用，通过整合456种细菌同源序列的进化信息，采用图论优化的GRASP算法构建最大后验概率祖先序列，鉴定出32个关键稳定性退化位点进行祖先残基回复。突变体Tm值达76.8℃，较野生型提升11.2℃。该突变体在pH 2.5‑9.0范围内保持高活性，成功应用于高温果汁加工生产线，使酶制剂消耗量降低60％。本发明为工业酶的热稳定性改造提供了新的方法论框架。