血液或尿液ctDNA提取与测序文库构建方法及试剂盒

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血液或尿液ctDNA提取与测序文库构建方法及试剂盒
申请号:CN202510773142
申请日期:2025-06-11
公开号:CN120700103A
公开日期:2025-09-26
类型:发明专利
摘要
本发明公开了血液或尿液ctDNA提取与测序文库构建方法及试剂盒,涉及分子诊断与基因检测技术领域,提取方法包括样本预处理和浓缩处理;使用磁珠和捕获探针捕获ctDNA;洗脱;使用核酸外切酶处理;验证质量。测序文库的构建方法包括:ctDNA与含UMI标签的接头连接;使用特异性探针捕获目标片段;对连接产物PCR扩增;试剂盒为两种方法的应用。提取方法通过优化血液和尿液的预处理条件,适应不同样本类型的理化特性;并通过特异性吸附系统结合核酸外切酶处理,有效富集目标ctDNA。测序文库的构建方法通过引入含UMI标签的接头连接,确保测序文库中每个分子具有唯一标识,提高变异检测的准确性;使用特异性探针捕获目标片段,减少非特异性扩增。
技术关键词
测序文库构建方法 捕获探针 链霉亲和素 测序试剂盒 T4DNA连接酶 多重探针 超滤离心管 吸附系统 磁珠 洗脱缓冲液 通用PCR引物 毛细管电泳芯片 血液 样本 毛细管电泳仪 构建测序文库
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