摘要
本发明公开了血液或尿液ctDNA提取与测序文库构建方法及试剂盒,涉及分子诊断与基因检测技术领域,提取方法包括样本预处理和浓缩处理;使用磁珠和捕获探针捕获ctDNA;洗脱;使用核酸外切酶处理;验证质量。测序文库的构建方法包括:ctDNA与含UMI标签的接头连接;使用特异性探针捕获目标片段;对连接产物PCR扩增;试剂盒为两种方法的应用。提取方法通过优化血液和尿液的预处理条件,适应不同样本类型的理化特性;并通过特异性吸附系统结合核酸外切酶处理,有效富集目标ctDNA。测序文库的构建方法通过引入含UMI标签的接头连接,确保测序文库中每个分子具有唯一标识,提高变异检测的准确性;使用特异性探针捕获目标片段,减少非特异性扩增。
技术关键词
测序文库构建方法
捕获探针
链霉亲和素
测序试剂盒
T4DNA连接酶
多重探针
超滤离心管
吸附系统
磁珠
洗脱缓冲液
通用PCR引物
毛细管电泳芯片
血液
样本
毛细管电泳仪
构建测序文库