一种同步检测CRISPR脱靶位点与病毒载体整合位点的体内检测方法

本发明涉及分子生物学、核酸检测与生物信息学交叉技术领域，公开了一种同步检测CRISPR脱靶位点与病毒载体整合位点的体内检测方法。本发明提供的一种同步检测CRISPR脱靶位点与病毒载体整合位点的体内检测方法首次将AAV载体自身的反向末端重复序列(ITR)用作标签序列，通过设计通用的PCR扩增引物和引入唯一分子标识符(UMI)技术，同时捕捉和精准识别体内CRISPR编辑过程中的脱靶事件和AAV载体整合事件。本发明提供的一种同步检测CRISPR脱靶位点与病毒载体整合位点的体内检测方法相较现有GUIDE‑seq、DISCOVER‑Seq+、OliTag‑seq、U‑DiTaS等方案，在体内适用性、检测深度、操作经济性和产业化标准化方面均实现了显著突破。