摘要
本申请提供一种蛋白质检测方法及实施该方法的试剂盒,蛋白质检测方法包括:将抗体包被的捕获珠子添加到样本中,捕获目标蛋白质分子;使用生物素化的检测抗体和链霉亲和素‑多HRP标记捕获的目标蛋白质分子,形成完整的酶标记免疫复合物;在含有过氧化氢和酪酰胺‑荧光团偶联物的溶液中,生成共价连接的荧光染料;将珠子固定在纤维蛋白水凝胶中,形成纤维蛋白水凝胶层进行珠子固定化;捕获珠子阵列的亮场和荧光图像,分析图像进行单分子计数。本申请用酪酰胺信号放大,通过在珠子上实现信号放大步骤,且荧光团直接与珠子结合,消除了将珠子分隔在微孔阵列或微流体液滴中的需要,减少对昂贵设备和复杂微流体或机器人技术的需求。
技术关键词
蛋白质检测方法
珠子
水凝胶层
酰胺
试剂盒
倒置荧光显微镜
抗体
生物素
荧光染料
玻璃载玻片
分子
顺磁性
凝血酶
链霉亲和素
图像
复合物
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