摘要
本发明涉及分子生物学和动物遗传改良技术领域,具体涉及一种猪MTSS1基因远端增强子、sgRNA及其应用。本发明利用CUT&Tag技术在猪骨骼肌中构建组蛋白修饰图谱,筛选出MTSS1上游潜在增强子;随后,通过双荧光素酶报告系统验证其增强子活性;进一步采用3C‑qPCR证实该增强子与MTSS1启动子存在染色质空间互作;并在原代成纤维细胞中利用CRISPR/Cas9敲除该增强子序列,qRT‑PCR检测其对MTSS1表达的影响。结果表明,该增强子具显著调控作用。本发明为解析MTSS1调控机制及骨骼肌育种提供技术支持。
技术关键词
增强子
重组载体
基因编辑工具
遗传改良技术
单链寡核苷酸
双荧光素酶
细胞模型
序列
互补链
启动子
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动物
机制
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