一种高通量单细胞ATAC-seq测序文库的构建方法

本发明公开了一种高通量单细胞ATAC‑seq测序文库的构建方法，属于单细胞染色质可及性测序技术领域。所述方法包括：采用带有尿嘧啶脱氧核糖核苷酸的单一核酸特异序列与Tn5转座酶组装成Tn5转座酶复合体，该转座复合体可以随机结合靶DNA序列，进行剪切、插入其携带的DNA片段。使用Tn5转座酶复合体对透化的细胞核进行转座反应；采用微流控芯片制备单细胞液滴，通过PCR将酶切产生的DNA片段末端补齐，并进行单细胞编码标记；最后进行PCR扩增及文库构建。采用单一核酸序列接头与Tn5转座酶组装策略，从根本上解决了传统两种及以上核酸序列组装的Tn5转座酶在核酸片段插入时，因双端核酸序列相同接头插入而导致的PCR扩增失败问题，显著提高了有效DNA片段的回收率和检测数。