一种TGF-β激活型CAR-NK细胞的制备及应用

本发明属于肿瘤细胞免疫治疗技术领域，具体涉及一种TGF‑β激活型CAR‑NK细胞的制备及应用。本发明所述制备方法，包括慢病毒表达质粒的构建、转化、筛选、病毒包装及病毒颗粒制备、感染细胞、细胞扩增等步骤。本发明构建的CD276CAR.TGFBR2‑KO‑T4z‑NK92细胞可以有效结合TGF‑β的受体蛋白和CD276抗原，通过TGF‑β1激活NK细胞规避了CAR‑NK细胞因抗原缺失或者下调导致的肿瘤逃逸，而且彻底避免TGF‑β1免疫抑制作用，从而为改善食管鳞状细胞癌的防治技术奠定一定技术基础。通过流式细胞术评估NK‑92细胞在肿瘤组织中的浸润情况，CD276CAR.TGFBR2‑KO‑T4z‑NK92细胞的肿瘤浸润率明显高于其余对照细胞。总的来说，这些数据表明CD276CAR.TGFBR2‑KO‑T4z‑NK92细胞在体内外具有优越的抗肿瘤活性，并且CD276CAR.TGFBR2‑KO‑T4z‑NK92细胞在肿瘤中的持久性增强。