摘要
本发明涉及一种基于dPCR检测TP53基因突变的检测方法和试剂盒,其引物和探针是根据TP53基因DNA序列设计的,针对TP53基因第6和第8外显子基因序列分别设计了一对引物和两条Taqman探针,引物和探针序列均与野生型TP53基因序列相同,每个外显子上的两条探针互为参照,当探针覆盖区域存在插入、替换、缺失等突变时,对应的探针则不能与模板结合而被酶切发出荧光,所以该枚探针可检出发生于TP53基因的多种突变。检测方法包括提取样本DNA、配制dPCR反应混合液、制备微滴、进行PCR扩增以及信号收集计算浓度步骤。本发明的试剂盒检测TP53基因突变操作简单,灵敏度高,价格低廉,适用于对患者突变克隆负荷的持续监测。
技术关键词
拷贝数
荧光淬灭基团
试剂盒
引物
Taqman探针
基因
混合液
标记
样本
DNA序列
微滴
突变型
模板
液滴
芯片
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