一种基于RPA-CRISPR/Cas12b技术的玉米四种病原菌快速检测方法

本发明公开了一种基于RPA‑CRISPR/Cas12b技术的玉米四种病原菌快速检测方法，属于核酸检测技术领域。所述方法针对玉米内州萎蔫病菌（CMN）、玉米细菌性枯萎病菌（Pss）、玉米褪绿斑驳病毒（MCMV）和玉米矮花叶病毒（MDMV）四种检疫性有害生物，提供了特异性RPA引物对及sgRNA序列。通过重组酶聚合酶扩增（RPA）与CRISPR/Cas12b检测技术的联合，并集成于离心微流控芯片，实现了对多靶标核酸的高灵敏度、高特异性检测，可在30分钟内完成“样本入‑结果出”的一体化检测，有效避免了开盖操作，极大降低了气溶胶污染的风险，适用于口岸检疫及田间现场快速检测，为玉米病害的早期诊断与防控提供了高效技术手段。