摘要
本发明公开了一种基于RPA‑CRISPR/Cas12b技术的水稻三种病原菌快速检测方法,属于核酸检测技术领域。所述方法针对水稻谷枯病菌(BG)、水稻细菌性条斑病菌(XOC)和水稻白叶枯病菌(XOO)三种检疫性有害生物,提供了特异性RPA引物对及sgRNA序列。通过重组酶聚合酶扩增(RPA)与CRISPR/Cas12b检测技术的联合,并集成于离心微流控芯片,实现了对多靶标核酸的高灵敏度、高特异性检测,可在30分钟内完成“样本入‑结果出”的一体化检测,有效避免了开盖操作,极大降低了气溶胶污染的风险,适用于口岸检疫及田间现场快速检测,为水稻病害的早期诊断与防控提供了高效技术手段。
技术关键词
水稻细菌性条斑病菌
离心式微流控芯片
引物
核苷酸
快速检测方法
序列
离心微流控芯片
叶枯病菌
核酸检测技术
现场快速检测
荧光
稻谷
报告
样本
分子
聚合酶
恒温
基团
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检测点
快速检测方法
矿山
综合误差
快速检测装置
原核表达载体
原花青素
植物过氧化物酶
基因检测试剂盒
荷花
快速检测方法
手持检测仪
快速检测系统
识别分析系统
数据服务平台
荧光
脱氧核酶探针
检测大肠杆菌
快速检测方法
底物