摘要
本发明涉及基因技术领域,尤其涉及一种Trmt61a酶活性缺失的斑马鱼模型的制备,用于制备稳定遗传trmt61aD181A‑P2A‑EGFP敲入的斑马鱼品系。本发明利用CRISPR/Cas9技术将trmt61a D181A突变位点特异性引入斑马鱼基因组中,获得了Trmt61a催化活性缺失、tRNA m1A修饰水平显著降低的斑马鱼模型。该斑马鱼模型填补了现有研究空白,为tRNA m1A表观遗传修饰相关的生物发育调控机制研究、疾病(如恶性肿瘤、造血功能异常)病理机制解析提供了可用的体内研究模型,可直接用于探究该表观遗传修饰在发育和疾病中的核心作用。
技术关键词
斑马鱼模型
引物
核苷酸
序列
表观遗传修饰
质粒
拼接技术
调控机制研究
基因
供体
斑马鱼胚胎
荧光显微镜
造血功能
模板
心脏
载体
疾病
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