数字化单分子酶多活性特征跨尺度异质性动态评估方法

本发明公开了一种数字化单分子酶多活性特征跨尺度异质性动态评估方法，包括：将预结合完成的酶‑模板‑引物三元复合物稀释至单分子水平以载入微孔阵列芯片中的反应腔室进行滚环扩增，并利用分子信标与扩增产物结合释放荧光信号；实时监测并获取所述荧光信号以生成时间分辨的荧光强度曲线；提取所述荧光强度曲线的斜率参数以通过转换计算得到催化合成速率用于评估酶活性；利用n重高斯混合模型拟合催化合成速率值分布以获得用于评估群体均一性的标准差和用于评估稳定性的变异系数。本发明能够同时实现单分子分辨率、多参数动态关联及环境干扰处理的跨尺度分析，并通过整合单分子荧光追踪与群体统计，突破了传统分析技术的分辨率限制。