基于SPR技术的捕获模式下Cyfra21-1的免疫活性浓度检测方法

本发明公开了一种基于SPR技术的捕获模式下Cyfra21‑1的免疫活性浓度检测方法，在捕获模式下结合Cyfra21‑1抗体，通过不同流速注射不同浓度的Cyfra21‑1蛋白使用SPR技术测量在部分传质限制下抗体与Cyfra21‑1蛋白的扩散结合速率，结合Cyfra21‑1蛋白的已知扩散系数可以推算出分析物的免疫活性浓度。本发明采用直接分析法和捕获模式下的分析法进行对比来证实捕获模式下分析效果的可靠性。捕获模式下的免疫浓度分析法将protein G通过胺偶联方法完全覆盖固定在芯片上，通过控制抗体浓度、进样时间和进样流速来获得与直接分析法相同的抗体偶联水平。随后利用数学模型拟合参数，获得Cyfra21‑1的免疫活性浓度。该方法不需要每个抗体耦连一块芯片，可以实现芯片的反复利用，节约检测成本。