摘要
本申请涉及生物技术领域,尤其涉及一种ttc21b基因缺失动物模型的构建方法及其应用;该构建方法包括:设计靶向ttc21b基因的sgRNA序列;使用sgRNA序列对模板PCR扩增,得到转录模板gDNA,分别对转录模板gDNA和pT3‑Cas9质粒体外转录并混合,得到sgRNA和Cas9mRNA混合物;向斑马鱼单细胞期受精卵中注射该混合物,得到含突变基因的斑马鱼;饲养含突变基因的斑马鱼后筛选得到ttc21b基因缺失的斑马鱼模型;本申请通过CRISPR/Cas9基因编辑技术得到ttc21b基因缺失的斑马鱼模型,可以为探究肾单位肾痨及其相关纤毛病的发病机制研究和治疗药物的筛选提供一种理想的动物模型。
技术关键词
转录模板
通用反向引物
发病机制研究
序列
斑马鱼模型
动物模型构建方法
核苷酸
启动子
混合物
Cas9基因
治疗药物
质粒
编辑技术
试剂盒
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