SIK1/PKM2/REGγ信号通路通过调控糖酵解抑制肝癌的研究方法

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SIK1/PKM2/REGγ信号通路通过调控糖酵解抑制肝癌的研究方法
申请号:CN202411027239
申请日期:2024-07-30
公开号:CN119199131A
公开日期:2024-12-27
类型:发明专利
摘要
本发明属于生物医学技术领域,具体为SIK1/PKM2/REGγ信号通路通过调控糖酵解抑制肝癌的研究方法,包括以下步骤:S1:体外细胞学实验;S2:体内动物实验,构建干扰或稳定表达SIK1、REGγ、PKM2的慢病毒载体质粒,获得相应稳定低表达及高表达的细胞株后,取对数生长期,皮下瘤模型:分别皮下注射,按2×106/鼠接种到4‑5周龄的BALB/c裸鼠背部两侧,10只/组;检测皮下瘤情况:每周观察皮下肿瘤形成情况,测量肿瘤直径,计算肿瘤体积,肿瘤体积=长径×短径平方/2;S3:临床验证。本发明中明确了SIK1、PKM2、磷酸化PKM2和REGγ在临床肝细胞癌患者组织中表达水平的相关性,结合随访资料阐明其表达水平与肝细胞癌是否转移的关系,将为临床肝细胞癌的靶向治疗提供科学依据。
技术关键词
抑制肝癌 辣根过氧化物酶标记 病毒载体 组织 肝细胞癌患者 稳定低表达 皮下瘤模型 同位素 质粒 缓冲液 肿瘤 融合蛋白表达载体 低表达细胞系 PCR引物设计 蛋白纯化系统 聚丙烯酰胺凝胶 单克隆抗体 二氨基联苯胺 稳定高表达
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