摘要
本发明涉及原代细胞培养技术领域,具体涉及一种简便高效的海马原代神经元分离培养方法,基于不同细胞贴壁速度的差异性,通过翻转培养瓶+两次全换液的简单操作即可得到90%以上纯度的海马神经元;在胰酶消化后的制备单细胞悬液过程中,采用40μm筛网过滤去除杂质细胞,随后通过800rpm/min离心,进一步去除非神经元细胞。在培养1.5小时后,通过翻转T25培养瓶收集上清,丢弃贴壁的非神经元细胞,并倍比稀释计算细胞密度,将细胞液铺于预处理好的6孔板中,再次通过3小时培养和全换液,最终成功获得高纯度神经元。该方法简单高效,同时无需使用有可能影响实验结果的阿糖胞苷,确保了所获细胞的高纯度和高活力。
技术关键词
原代细胞培养技术
生物安全柜
细胞培养模型
培养箱
胚胎
专用培养基
培养瓶
组织
超净工作台
荧光显微镜
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