摘要
本发明公开了一种靶向敲除猪PKD2基因座的方法和应用,属于基因编辑工程技术领域。本发明基于CRISPR/Cas9系统设计了一种PKD2基因敲除方法,可以实现移码突变模拟基因敲除,具体地,本发明基于设计特定的sgRNA构建pX330‑E9打靶质粒,对巴马猪胚胎成纤维细胞进行基因编辑,成功获得了3种不同突变类型且实现PKD2基因敲除的细胞系,在猪基因编辑研究及相关领域具有重要应用价值,尤其单敲除PKD2基因的猪成纤维细胞模型,为多囊肾病的发病机理研究、治疗方法评估及新治疗靶点探索提供重要平台。
技术关键词
PKD2基因
基因编辑系统
重组细胞
遗传性多囊肾病
敲除模型
重组表达载体
Cas9核酸酶
打靶质粒
敲除方法
胚胎
动物模型
细胞系
染色体
医药
序列
平台
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基因编辑系统
位点
基因编辑技术
递送载体
逆转录
基因编辑系统
重组细胞
遗传性多囊肾病
敲除模型
重组表达载体
预测蛋白质序列
重组细胞
隐马尔科夫模型
三维结构
功能蛋白
疾病动物模型
重组表达载体
发病机制研究
核酸分子
重组细胞
干扰素
基因编辑系统
系统性红斑狼疮
基因编辑工具
反义寡核苷酸