摘要
本发明属于生物技术领域,具体公开了一种用于检测单个外泌体亚群的探针组合物、CRISPR/Cas12a报告器及其制备与应用。所述探针组合物包括两种适配体探针,识别外泌体膜上的靶蛋白(PD‑L1和EpCAM)后会发生变构,暴露出与crRNA特异性结合区域,与Cas12a/crRNA杂交,协同激活Cas12a反式切割报告链,产生荧光信号;荧光信号强度与外泌体数量成正比,可直接定量外泌体亚群;借助液滴微流控技术将反应体系限制在液滴内发生,可通过双重限域效应提高检测灵敏度。基于此,本发明开发了用于检测单个外泌体亚群的CRISPR/Cas12a报告器、系统和方法等,可简化操作流程,实现一步法检测。
技术关键词
探针
报告
液滴微流控技术
程序性死亡配体
肿瘤诊断试剂
荧光分光光度计
重复序列
微流控液滴
一步法检测
蛋白
荧光显微镜
微流控芯片
靶标
基团
复合物
寡核苷酸
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