一种基于非均一液滴的双重数字核酸检测方法

本发明公开了一种基于非均一液滴的双重数字核酸检测方法，该方法包括：将含有至少两种靶标核酸的核酸样本与含有对应至少两种特异性引物的引物样本加入至扩增反应体系中，得到扩增试剂；对所述扩增试剂生成非均一的液滴；对所述液滴进行扩增；将扩增后的液滴注入至微通道内并利用成像设备对所述微通道内的液滴进行成像，得到液滴图像；通过图像分析算法提取所述液滴图像中液滴的大小以及沉淀物的光密度值，并结合各类型液滴的液滴特征曲线、液滴的大小以及沉淀物的光密度值确定液滴的类型；统计各类型液滴占总液滴数的比例，根据各类型液滴占总液滴数的比例计算出在所有液滴中至少两种靶标核酸的浓度。本发明可实现无标记、多靶标的数字核酸检测。