摘要
本发明公开了一种牦牛肌内前体脂肪永生化细胞系及其制备方法,该方法包含:(1)牦牛原代肌内前体脂肪细胞的获得;(2)SV40T慢病毒感染牦牛肌内前体脂肪细胞并筛选细胞株:利用1/2小体积感染法进行SV40T慢病毒感染,以获得牦牛原代肌内前体脂肪细胞感染SV40T后的永生化细胞,简称永生化细胞;采用嘌呤霉素筛选永生化细胞;将所述筛选后的细胞利用有限稀释法进行稀释并扩大培养,获得永生化细胞系。本发明构建的牦牛肌内前体脂肪永生化细胞系具有遗传均一性,排除了细胞群体的异质性影响,为后续有关牦牛肌内脂肪细胞的研究提供体外细胞模型。
技术关键词
永生化细胞系
培养基
脂肪
病毒原液
恒温培养箱
培养液
消化液
CO2培养箱
细胞过滤器
慢病毒
细胞培养皿
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