摘要
本发明公开了一种基于发卡结构的荧光DNA探针,通过筛选优化探针的茎区长度、GC含量、环区序列和热力学参数,改善了其分子稳定性、反应动态性和检测灵敏度,最终得到序列为:5'‑FAM‑GCAGCTATTTTTAGCTGC‑DABCYL‑3'的荧光DNA探针。同时,本发明还研发了基于所述探针的检测方法和荧光检测试剂盒,采用双波长比率检测策略、适配赛默飞LUX酶标仪的改进的温控系统、动力学连续检测模式、四参数逻辑回归算法校正拟合标准曲线等手段,最终能够实现对DNAse酶的高灵敏度、动态范围广、简便快速的检测,具备低成本、强稳定性、高精度等优势,具有开拓性的临床应用价值和广阔的市场前景。
技术关键词
逻辑回归算法
双波长比率
荧光底物探针
荧光检测试剂盒
发卡结构
酶标仪
基团
缓冲液
曲线斜率
温控系统
开拓性
参数
策略
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