摘要
本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种具有杯状细胞表型的胃黏膜肠上皮化生类器官模型的构建方法。本发明所述模型以MUC2+MUC6+杯状细胞为特征,从细胞表型上更加深入的模拟了胃黏膜肠上皮化生的组织学特征。本发明的构建方法,包括如下步骤:(一)获取人胃腺体以制备类器官;(二)类器官的传代培养;(三)pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑CDX2‑Puro过表达慢病毒载体构建;(四)病毒包装;(五)CDX2过表达稳转细胞和类器官构建;(六)CDX2过表达类器官梯度分化以制备肠上皮化生类器官。本发明首次在体外模型中实现了胃肠黏膜肠上皮化生过程中细胞学层面的病理转变,为胃癌癌前病变的诊断、预防以及个体化精准治疗提供新的研究模型和理论指导。
技术关键词
类器官模型
3D类器官培养
表达慢病毒载体
大肠杆菌感受态细胞
胃癌癌前病变
培养基
克隆载体
低温保存
绿色荧光蛋白
质粒
生物医药技术
胃肠黏膜
多阶段
包装
组织
培养箱
复合物
切块
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基因过表达载体
动物
大肠杆菌感受态细胞
制剂
引物
器官芯片
模型建立方法
模拟肿瘤微环境
组织
细胞系
器官芯片
类器官模型
培养基
生物墨水材料
生物医学工程技术
细胞共培养模型
细胞悬液
外周血
混合液
肿瘤类器官模型
肿瘤类器官模型
疗效评估方法
药物溶液
培养基
光学显微镜