一种具有杯状细胞表型的胃黏膜肠上皮化生类器官模型的构建方法

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一种具有杯状细胞表型的胃黏膜肠上皮化生类器官模型的构建方法
申请号:CN202411967156
申请日期:2024-12-30
公开号:CN119842824A
公开日期:2025-04-18
类型:发明专利
摘要
本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种具有杯状细胞表型的胃黏膜肠上皮化生类器官模型的构建方法。本发明所述模型以MUC2+MUC6+杯状细胞为特征,从细胞表型上更加深入的模拟了胃黏膜肠上皮化生的组织学特征。本发明的构建方法,包括如下步骤:(一)获取人胃腺体以制备类器官;(二)类器官的传代培养;(三)pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑CDX2‑Puro过表达慢病毒载体构建;(四)病毒包装;(五)CDX2过表达稳转细胞和类器官构建;(六)CDX2过表达类器官梯度分化以制备肠上皮化生类器官。本发明首次在体外模型中实现了胃肠黏膜肠上皮化生过程中细胞学层面的病理转变,为胃癌癌前病变的诊断、预防以及个体化精准治疗提供新的研究模型和理论指导。
技术关键词
类器官模型 3D类器官培养 表达慢病毒载体 大肠杆菌感受态细胞 胃癌癌前病变 培养基 克隆载体 低温保存 绿色荧光蛋白 质粒 生物医药技术 胃肠黏膜 多阶段 包装 组织 培养箱 复合物 切块
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