摘要
本发明公开了一种二价猫杯状病毒VLP疫苗的制备方法和应用,通过创新性地利用昆虫细胞内源分子伴侣蛋白HSP60,构建共表达HSP60及FCV VP1的重组质粒,并成功提升了VP1的表达量,其中GII VP1提升了9.2倍,GI VP1提升了17倍。通过筛选不同盐离子浓度、pH值和成分的组装缓冲液,优化GI VLP和GII VLP的组装条件,提高VLP的产量和收率。动物模型评估显示,二价VLP疫苗具有免疫协同作用,其免疫效果显著优于单价VLP疫苗及市售灭活疫苗,且低剂量二价VLP疫苗即可达到高剂量相同的免疫效果,减少了4‑8倍的抗原剂量需求,同时提供对两种FCV分型的保护,为FCV疫苗研发提供了新方向。
技术关键词
VLP疫苗
猫杯状病毒
HSP60基因
凝胶过滤层析
伴侣
缓冲液
分子
重组载体
核苷酸
序列
佐剂
动物模型
氢氧化铝
质粒
收率
蛋白
离子
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