摘要
本发明公开了一株表达绿色荧光的杀香鱼假单胞菌重组菌株及其构建方法和应用。所述构建方法通过构建pBBR1‑GFP质粒,并将其转化入杀香鱼假单胞菌NB2011,获得了稳定表达绿色荧光的重组菌株P. plecoglossicida NB2011/pBBR1‑GFP。该重组菌株在荧光显微镜下观察时呈现绿色荧光,且在传代30代后,质粒稳定率可达100%,该菌株通过电转化法构建,并通过氯霉素筛选阳性克隆,具有较强的遗传稳定性,通过感染实验,该荧光重组菌株在鼠巨噬细胞J774A.1和斑马鱼幼鱼中表现出较好的可视化能力,能够实时观察菌株与宿主细胞和组织的相互作用。本发明提供了一种直观、稳定的荧光标记工具,能够用于研究杀香鱼假单胞菌的致病机制,为病原菌与宿主相互作用的研究提供了新方法和技术手段。
技术关键词
杀香鱼假单胞菌
氯霉素
荧光显微镜
绿色荧光标记
动物感染模型
斑马鱼幼鱼
琼脂培养基
荧光倒置显微镜
质粒提取试剂盒
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