一种利用人源细胞系的三维细胞模型筛选具有诱导粘液高分泌毒性化学品的方法

本发明提供一种利用人源细胞系的三维细胞模型筛选具有诱导粘液高分泌毒性化学品的方法，属于生物毒性评价技术领域。本发明首先将16HBE细胞悬浮培养获得三维细胞模型，分别加入含一系列不同浓度待测试样品的培养液，孵育48h，检测得到抑制细胞活力20％的暴露浓度；然后将三维细胞模型暴露于含该浓度测试样品的培养液中36～50h，通过免疫荧光化学法检测粘液标志蛋白MUC5AC蛋白的表达情况，分析实验组与阴性对照组是否具有统计学差异，若具有统计学差异，认定该化学品具有粘液高分泌毒性。本发明操作简便、成本低，三维模型构建效率高，并可直接在培养孔板中进行细胞活力和蛋白标志物的原位检测，便于多重生物学指标测试，有助于扩展为更全面系统的测试体系。