摘要
本发明涉及一种静息态精原干细胞的构建方法与应用,属于基因工程技术领域。本发明分别构建青鳉ptch1与ptch2的基因敲除载体NeoR‑gRNA‑zCas9,将ptch1与ptch2基因敲除载体以脂质体转染青鳉精原干细胞系SG3,经单克隆细胞筛选和Sanger测序鉴定,最后获得静息态青鳉精原干细胞株(即SG3‑ptch1‑/‑;ptch2‑/‑)。本发明构建的青鳉精原干细胞静息态的体外细胞模型,可应用于精原干细胞静息态的相关研究,同时也可应用于精原干细胞体外维持技术体系的开发。
技术关键词
基因敲除载体
新霉素抗性基因
抗生素
CMV启动子
基因工程技术
细胞模型
引物
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单克隆
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医学
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