摘要
本发明涉及胰岛素抵抗技术领域,尤其涉及一种基于CTRP9促进信号通路的胰岛素抵抗方法。步骤如下:构建人肝细胞系质粒;进行细胞培养及转染;检测CTRP9对LO人肝细胞葡萄糖摄取、PGC‑1a基因表达以及胰岛素信号通路相关蛋白的磷酸化水平的影响;检测CTRP9对LO人肝细胞胰岛素抵抗模型的葡萄糖摄取、PGC‑1a基因表达以及胰岛素信号通路相关蛋白的磷酸化水平的影响;进行SirT1/PGC‑1a蛋白表达检测。本发明提供的一种基于CTRP9促进信号通路的胰岛素抵抗方法,以人肝细胞系为体外研究对象,模拟体内研究环境,建立对应的胰岛素抵抗模型,用流式细胞仪分析、RT‑PCR、蛋白免疫印迹、信号通路抑制等技术,研究CTRP9对肝细胞胰岛素抵抗的治疗作用及具体的作用机制。
技术关键词
胰岛素信号通路
胰岛素抵抗模型
免疫荧光染色技术
无血清培养基
细胞系
质粒
基因
蛋白免疫印迹
成像技术
流式细胞仪
标记方法
抗体
机制
单克隆
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试剂盒
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